产品说明 N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-7-amido-4-methylcoumarin(…
产品说明
N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-7-amido-4-methylcoumarin(Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC)产品说明
1. 产品概述与化学特性
本产品为高纯度荧光底物,化学名称为N-乙酰基-Asp-Glu-Val-Asp-7-氨基-4-甲基香豆素,CAS号169332-61-0,分子式C30H37N5O13,分子量675.641。其结构包含 caspase 酶特异性识别序列(DEVD)与荧光报告基团7-氨基-4-甲基香豆素(AMC),在酶解后可释放AMC产生蓝色荧光(激发/发射波长380/460 nm)。产品为白色至类白色粉末,纯度≥96%,需避光保存于干燥环境。
2. 生物化学功能与重要性
该化合物是caspase-3/7的关键底物,通过模拟天然凋亡蛋白PARP的酶切位点(DEVD),特异性检测 caspase 活性。其荧光信号强度与酶活性呈线性相关,广泛应用于细胞凋亡机制研究。相较于传统比色法,AMC荧光检测具有灵敏度高(检测限可达pmol级)、动态范围广的特点,是凋亡研究的金标准工具之一。
3. 主要应用领域与具体用途
(1)细胞凋亡检测:用于药物筛选、肿瘤治疗评估等场景中 caspase-3/7 活性的定量分析;
(2)酶动力学研究:测定 caspase 酶Km/Vmax 等参数;
(3)高通量筛选:适配96/384孔板检测系统,适用于自动化平台;
(4)抑制剂开发:作为底物评估 caspase 抑制剂的IC50值。
4. 储存条件与使用建议
储存条件:-20℃避光干燥保存,长期储存建议充入惰性气体。开封后需分装以避免反复冻融。
使用建议:
(1)溶解前恢复至室温,推荐使用DMSO配制10 mM母液;
(2)工作浓度通常为10-50 μM,需根据实验体系优化;
(3)反应缓冲液应含10 mM DTT以维持酶活性;
(4)避免接触强氧化剂或金属离子。
5. 质量控制与安全信息
质量控制:经HPLC验证纯度≥96%,质谱确认分子量,内毒素检测<0.1 EU/μg。
安全信息:
(1)危害声明:H315-H319-H335(可能造成皮肤刺激、眼刺激和呼吸道刺激);
(2)防护措施:佩戴手套/护目镜,在通风橱中操作;
(3)废弃物处理:按危险化学品规范处置。
注:本产品仅限科研使用,不适用于诊断或治疗用途。具体实验方案请参考文献或联系技术支持。