DAF-FM DA产品说明书 1. 产品概述与化学特性 DAF-FM DA是一种高灵敏度的荧光探针,化学名称为…
DAF-FM DA产品说明书
1. 产品概述与化学特性
DAF-FM DA是一种高灵敏度的荧光探针,化学名称为[6′-乙酰氧基-4-氨基-2′,7′-二氟-5-(甲氨基)-3-氧代螺[2-苯并呋喃-1,9′-占吨]-3′-基]乙酸酯,CAS号为254109-22-3。其分子式为C25H18F2N2O7,分子量为496.416,纯度超过96%。该化合物为脂溶性衍生物,可穿透细胞膜,在细胞内酯酶作用下水解为DAF-FM,进而选择性检测一氧化氮(NO)。其结构中的螺环和荧光团设计使其在无NO环境下荧光微弱,与NO反应后荧光显著增强。
2. 生物化学功能与重要性
DAF-FM DA是NO研究的经典工具,通过特异性结合NO生成强荧光产物苯并三唑,激发/发射波长约为495/515 nm。其优势在于低背景信号、高选择性和灵敏度(可检测nM级NO),且不受活性氧干扰。在生理pH范围内稳定,适用于动态监测细胞内NO水平变化,对心血管、神经及免疫系统的信号传导研究至关重要。
3. 主要应用领域与具体用途
该探针广泛应用于活细胞或组织内NO的实时成像,包括:内皮细胞NO释放研究、炎症反应中巨噬细胞NO生成检测、神经递质调控机制分析等。亦可用于高通量药物筛选,如评估药物对NO合成酶(NOS)活性的影响。使用时需搭配荧光显微镜、流式细胞仪或酶标仪,推荐工作浓度为1-10 μM。
4. 储存条件与使用建议
储存于-20℃避光干燥环境,溶解于无水DMSO(建议浓度1-5 mM),分装保存以避免反复冻融。使用前需平衡至室温,避免强光照射。细胞孵育时间通常为30-60分钟,需以无血清培养基洗涤去除残余探针。注意:水解产物DAF-FM需在37℃下活化30分钟方可获得最佳灵敏度。
5. 质量控制与安全信息
本产品经HPLC验证纯度>96%,批号相关COA可随货提供。使用时需穿戴防护装备,避免吸入或接触皮肤。MSDS显示其可能引起眼睛刺激,操作应在通风橱中进行。废弃物需按有害化学品规范处置。建议与NO清除剂(如PTIO)联用作为实验对照,以确保数据可靠性。