1. 产品概述与化学特性
Fluo 4AM(Fluo-4 AM)是一种高灵敏度的荧光钙离子指示剂,化学名称为Fluo-4乙酰甲酯,CAS号为273221-67-3。其分子式为C51H50F2N2O23,分子量为1096.94,纯度超过96%。该化合物属于荧光染料家族,具有优异的细胞膜通透性,可在细胞内被酯酶水解为Fluo-4,从而实现对细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的高效检测。Fluo 4AM的激发波长为494 nm,发射波长为516 nm,与钙离子结合后荧光强度显著增强,适合用于动态钙信号研究。
2. 生物化学功能与重要性
Fluo 4AM作为钙离子荧光探针,能够特异性结合游离钙离子,其荧光信号变化与钙离子浓度呈正相关。这一特性使其成为研究细胞钙信号转导的重要工具。钙离子作为第二信使,参与调控多种生理过程,如肌肉收缩、神经递质释放、细胞凋亡和基因表达等。Fluo 4AM的高灵敏度和低毒性使其广泛应用于活细胞钙成像实验,为揭示钙依赖性生理机制提供了可靠手段。
3. 主要应用领域与具体用途
Fluo 4AM主要用于活细胞钙离子动态监测,适用于多种研究领域。在神经科学中,可用于检测神经元钙瞬变;在心血管研究中,用于分析心肌细胞钙振荡;在免疫学中,用于评估T细胞活化过程中的钙信号。此外,Fluo 4AM还可用于高通量筛选药物对钙通道或受体的调控作用。其兼容性广泛,适用于流式细胞术、共聚焦显微镜和微孔板检测等多种技术平台。
4. 储存条件与使用建议
Fluo 4AM应避光保存于-20°C干燥环境中,避免反复冻融以保持稳定性。使用前需用无水DMSO溶解配制成1-10 mM储存液,分装后于-20°C保存。工作浓度通常为1-10 μM,具体需根据细胞类型和实验条件优化。建议在加载探针后于37°C孵育30-60分钟,以确保充分水解。实验过程中需避免强光照射,并设置适当的阴性对照以排除自发荧光干扰。
5. 质量控制与安全信息
本产品经HPLC验证纯度>96%,且通过严格的细胞毒性测试。使用时需佩戴防护装备,避免直接接触皮肤或眼睛。如不慎接触,应立即用大量清水冲洗并就医。废弃物应按照有害化学品处理规范处置。Fluo 4AM仅供科研使用,不适用于诊断或治疗用途。详细安全数据可参考提供的MSDS(材料安全数据表)。