赫斯特荧光染料 33258

产品说明
1. 产品概述与化学特性
赫斯特荧光染料33258（Hoechst 33258），化学名称为p-[5-(4-methyl-1-piperazinyl)(2,5′-bi-1H-benzimidazol)-2′-yl]phenol trihydrochloride，是一种经典的DNA特异性荧光染料。其分子式为C25H27Cl3N6O，分子量为533.88，CAS号为23491-45-4。该产品以三盐酸盐形式存在，纯度≥96%，外观通常为淡黄色至橙色粉末，可溶于水或有机溶剂如DMSO。其化学结构中的苯并咪唑环赋予其与DNA小沟结合的特性，尤其对富含AT碱基的区域具有高亲和力。
2. 生物化学功能与重要性
赫斯特33258通过嵌入DNA双螺旋的小沟区域，在紫外光激发下（最大激发波长约352 nm）发射蓝色荧光（最大发射波长约461 nm）。其荧光强度与DNA含量呈线性关系，且对RNA几乎无干扰，因此被广泛用于DNA定量和细胞周期分析。该染料在活细胞中穿透性较弱，更适合固定细胞或膜通透性处理的样本，是细胞生物学和分子生物学研究的经典工具。
3. 主要应用领域与具体用途
该染料主要用于以下领域：
– 细胞核染色：用于荧光显微镜或流式细胞术检测细胞核形态及DNA分布。
– DNA定量分析：通过荧光分光光度法或微孔板检测系统定量dsDNA。
– 细胞周期研究：结合流式细胞术分析G0/G1、S、G2/M期细胞比例。
– 染色体显带：辅助观察染色体结构和异常。
– 凋亡检测：通过核碎裂或染色质凝聚的形态学变化判断凋亡进程。
4. 储存条件与使用建议
建议避光保存于-20°C干燥环境中，长期储存需充入惰性气体保护。工作液需现配现用，避免反复冻融。推荐使用PBS或HEPES缓冲液配制，浓度范围为0.1-10 μg/mL。染色时需注意避光操作，孵育时间通常为10-30分钟。对于固定细胞，建议先用0.1% Triton X-100通透处理以增强染色效率。
5. 质量控制与安全信息
本产品经HPLC验证纯度≥96%，批次间一致性严格把控。使用时需佩戴防护装备，避免直接接触皮肤或吸入粉尘。其水溶液可能对眼睛和呼吸道有刺激性，操作应在通风橱中进行。废弃物需按危险化学品规范处置。尽管毒性较低，但仍建议避免长期暴露，相关实验需符合实验室生物安全规程。